SweMagrose Protein A Antibody Purified Magnetic Beads

Protein A je protein na površini ćelijskog zida koji se nalazi u Staphylococcus aureusu sa molekulskom težinom od 42kDa. Protein A i protein G su funkcionalno slični i mogu se specifično vezati za imunoglobulin (Ig) sisara. Rekombinantni protein A i G sa odgovarajućim modifikacijama vezanim za magnetne kuglice mogu se koristiti za imunoprecipitaciju ili pročišćavanje antitijela. Magnetne kuglice proteina A pogodne su za imunoprecipitaciju humanih IgG1, IgG2, IgG4, mišjih IgG2a, IgG2b, dok su magnetne zrnce proteina G pogodne za imunoprecipitaciju humanih IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgGb, IgG2, IgGb miša. IgG3, pacovska IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c poliklonska antitijela. (Pogledajte tabelu I za konkretne informacije)

Ovaj proizvod usvaja samorazvijene i proizvedene magnetne kuglice označene proteinom A, u poređenju sa sličnim proizvodima na tržištu, ovaj proizvod efikasnije veže antitijela i ima nižu stopu nespecifičnog vezivanja, zajedno sa optimiziranim puferom, može se pogodan i efikasan za eksperimente imunoprecipitacije; može se široko koristiti u izolaciji i prečišćavanju ciljnih proteina u uzorcima kao što su ćelijski lizati, supernatanti stanične sekrecije, serum, ascites, itd.

Brod s mokrim ledom; Čuvati na 2-8 stepeni, važi 12 mjeseci.

Formulacije reagensa koje se odnose na pročišćavanje antitijela odnose se na sljedeće, korisnik se može prilagoditi prema specifičnim eksperimentalnim uvjetima.

Ručni postupak (primjer pročišćavanja mišjeg ascitesa IgG)

1. Obrada uzorka: uzmite 500 μL uzorka ascitesa, dodajte vezivni pufer za ispiranje da dobijete 500 μL, ako ima više proteinskih precipitata u uzorku, centrifugirajte supernatant za eksperimente, što može poboljšati čistoću antitijela.

2. Predtretman magnetnim kuglicama: 30 s vorteksirajte magnetne kuglice pročišćene antitijelima da se resuspendiraju u dovoljnoj mjeri, uzmite 100 μL 50% (v/v) SweMagrose Protein A pročišćenih magnetnih perli u drugoj novoj 1,5 mL EP epruveti, magnetski aspirirajte i bacite supernatanta, isperite ga sa 1 mL veziva pufer za pranje dva puta, a zatim uzmite supernatant nakon magnetne aspiracije.

Napomena: Količina kuglica se može podesiti prema količini antitijela u uzorku.

3. Adsorpcija antitijela: dodajte uzorak obrađen u koraku 1 magnetnim kuglicama u koraku 2, promiješajte i dobro promiješajte, stavite EP cijev u rotirajući mikser ili ručno lagano okrenite epruvetu na sobnoj temperaturi (oko 25 stepeni) kako biste napravili magnetne kuglice u punom kontaktu sa uzorkom, okrenite ga 15 minuta, stavite na stalak za magnetni separator na 30 s, a zatim bacite supernatant.

4. Ispiranje magnetnim kuglicama: dodajte 1 mL pufera za ispiranje vezivanja u EP epruvetu, resuspendirajte uz mućkanje i zatim magnetno apsorbirajte 30 s. Odbacite supernatant i ponovite operaciju 3 puta.

5. Eluiranje antitijela: Dodajte 0.5~1.0 mL eluenta u EP epruvete sa ispranim magnetnim perlicama kako je gore opisano, i brzo resuspendirajte epruvete pipetiranjem ili vorteksiranjem, a zatim lagano okrenite epruvete u obrtnom mikseru ili ručno na sobnoj temperaturi (oko 25 stepeni), odvojite epruvete magnetnim usisavanjem nakon okretanja 10 min, a zatim sakupite supernatant u nove EP epruvete.

6. Neutralizacija antitijela: dodajte određenu količinu otopine za neutralizaciju eluatu antitijela u koraku 5, općenito 1/10 volumena eluiranja antitijela (npr. ako je eluat antitijela 500 μL, količina dodane otopine za neutralizaciju je 50 μL) , tako da se pH vrijednost eluiranog antitijela održava u neutralnom okruženju, što pogoduje održavanju biološke aktivnosti antitijela i izbjegavanje inaktivacije antitijela.

7. Naknadna obrada magnetnih kuglica: Operite kuglice dva puta rastvorom za eluiranje nakon upotrebe, magnetski odvojite i bacite supernatant; zatim tri puta isperite vezujućim rastvorom za pranje, odvojite magnetski i bacite supernatant; resuspendirajte kuglice sa 200 µL rastvora za konzerviranje, a zatim ih čuvajte na 2~8 stepeni.

1. Pažljivo pročitajte ova uputstva prije nego što nastavite s pročišćavanjem antitijela.

2. Nemojte zamrzavati ili centrifugirati kuglice jer to može uzrokovati nepovratno agregiranje kuglica.

3. Ručni rad zahtijeva korištenje okvira za magnetno odvajanje.

Tabela 1

Samo za istraživačku upotrebu. Nije za upotrebu u dijagnostičkim ili terapijskim procedurama!

Popularni tagovi: Swemagrose protein a magnetske perle pročišćene antitijelom, Kina swemagrose protein pročišćene magnetske perle antitijela proizvođači, dobavljači, tvornica