Uvod u proizvod
|
Naziv proizvoda |
Cat. br. |
Spec. |
|
SDS-PAGE Fast Acrylamide Kit |
G2037-50T |
50 T |
Opis proizvoda/Uvod
Ovaj komplet pruža jednostavna i brza rješenja za pripremu SDS-PAGE gela. Sadrži sve reagense potrebne za pripremu gela, korisnici samo trebaju pripremiti malu količinu čiste vode i opreme za pripremu gela (gel baza, staklena ploča, češalj itd.) i slijediti upute kako bi proizveli potreban gel u kratkom vremenu . Ovaj komplet može pripremiti najmanje 50 gela uobičajene veličine.
Uslovi skladištenja i otpreme
Brod s mokrim ledom; Modificirani koagulant pohranjen na -20 stepen, ostali pohranjen na 2-8 stepen van svjetlosti, vrijedi 12 mjeseci.
Komponente proizvoda
|
Component Number |
Komponenta |
G2037-50T |
|
G2037-1 |
30% akrilamid (29:1) |
100 mL |
|
G2037-2 |
4×Tris-SDS Donji rastvor gela za razdvajanje |
100 mL |
|
G2037-3 |
4×Tris-SDS Gornji gel za slaganje |
30 mL |
|
G2037-4 |
PAGE katalizator očvršćavanja gela |
1 mL |
|
G{0}}ML |
Modifikovani koagulant |
1 mL×5 |
|
Manual |
Jedan primjerak |
|
Protokol/procedure analize
1. Odaberite odgovarajuću koncentraciju rastvora akrilamida prema molekulskoj težini ciljnog proteina;
|
SDS-PAGE koncentracija gela za odvajanje |
Optimalni opseg razdvajanja (kDa) (Tris-Glycine tekući pufer, G2018) |
Optimalni opseg razdvajanja (kDa) (SweRapid-High Resolution radni bafer, G2018) |
|
6% |
50-300 kDa |
15-300 kDa |
|
8% |
30-130 kDa |
10-250 kDa |
|
10% |
20-100 kDa |
5-150 kDa |
|
12% |
10-60 kDa |
3-100 kDa |
|
15% |
< 40 kDa |
< 60 kDa |
2. Koncentracija gela za razdvajanje odabrana je prema veličini molekulske težine ciljnog proteina, uzmite gel ploču (pojedinačni komad) sa uobičajenim specifikacijama od 8,3×7,3 cm kao primjer, sljedeća tabela se može koristiti za priprema rastvora gela:
|
Koncentracija gela za odvajanje (%) |
6% |
8% |
10% |
12% |
15% |
||||||||||
|
Debljina staklene ploče (mm) |
0.75 mm |
1.0 mm |
1,5 mm |
0.75 mm |
1.0 mm |
1,5 mm |
0.75 mm |
1.0 mm |
1,5 mm |
0.75 mm |
1.0 mm |
1,5 mm |
0.75 mm |
1.0 mm |
1,5 mm |
|
Ukupna zapremina rastvora gela* (mL) |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
|
H2O (mL) |
2.16 |
3.24 |
4.32 |
1.89 |
2.84 |
3.78 |
1.63 |
2.44 |
3.25 |
1.36 |
2.04 |
2.72 |
0.96 |
1.44 |
1.92 |
|
30% akrilamida (29:1) (mL) |
0.8 |
1.2 |
1.6 |
1.07 |
1.6 |
2.14 |
1.33 |
2.0 |
2.67 |
1.6 |
2.4 |
3.2 |
2.0 |
3.0 |
4.0 |
|
4 x Tris-SDS otopina donjeg odvajajućeg gela (mL) |
1.0 |
1.5 |
2.0 |
1.0 |
1.5 |
2.0 |
1.0 |
1.5 |
2.0 |
1.0 |
1.5 |
2.0 |
1.0 |
1.5 |
2.0 |
|
Modificirani koagulant (µL) |
40 |
60 |
80 |
40 |
60 |
80 |
40 |
60 |
80 |
40 |
60 |
80 |
40 |
60 |
80 |
|
PAGE katalizator očvršćavanja gela (µL) |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
*Ukupna zapremina rastvora gela ne uključuje zapreminu katalizatora očvršćavanja gela PAGE.
3. Pripremite gornji gel za slaganje prema sljedećoj tabeli:
|
Koncentracija gornjeg gela za slaganje |
5% |
|||
|
H2O/mL |
1.75 |
2.63 |
3.5 |
5.25 |
|
30% akrilamida (29:1)/mL |
0.5 |
0.75 |
1 |
1.5 |
|
4 x Tris-SDS Donji rastvor gela za razdvajanje/mL |
0.75 |
1.13 |
1.5 |
2.25 |
|
Modifikovani koagulant/µL |
18 |
27 |
36 |
54 |
|
PAGE katalizator očvršćavanja gela/μL |
4 |
6 |
8 |
12 |
|
Ukupni volumen/mL |
3 |
4.5 |
6 |
9 |
*Ukupna zapremina ne uključuje zapreminu katalizatora očvršćavanja gela PAGE.
4. Preporučeni uslovi elektroforeze:
a) Koristite bafer za rad SweRapid-High Resolution (G2018) na konstantnom naponu od 200-250 V tokom 25-35 min.
b) Ili koristite Tris-Glycine pufer (G2018). Gornji gel se postavlja na napon od 90 V, a elektroforeza se izvodi oko 30 min (marker je ušao u separacijski gel). Napon donjeg gela je podešen na 150-180 V, oko 60-90 min (Podesite prema stvarnoj situaciji).
Napomena
1. Prevelika temperaturna razlika u procesu proizvodnje topline ljepila može proizvesti mjehuriće, preporučuje se da ljepilo bude spremno da se vrati na sobnu temperaturu, a zatim dodati poboljšani koagulant za geliranje, čime se efikasno može izbjeći stvaranje malih mjehurića u procesu geliranja.
2. Modifikovano ima bolju stabilnost u odnosu na amonijum persulfat (AP). Izvadite jednu za upotrebu i čuvajte je na 4 stepena nakon upotrebe za naknadnu rutinsku upotrebu, koja se može čuvati šest meseci. Ako se ne koristi duže vrijeme, čuvajte ga na -20 stepenu kako biste izbjegli ponovno smrzavanje i odmrzavanje.
3. Tricine gel se preporučuje za odvajanje proteina manje od 10 kDa; akrilamidni gelovi možda neće biti dovoljni za odvajanje.
4. Temperatura ima značajan uticaj na vreme geliranja lepka. Kako bi se osigurao nesmetan napredak eksperimenta, općenito, niže temperature dovode do dužih vremena geliranja, pa će možda biti potrebno povećati dozu modificiranog koagulanta u skladu s tim. S druge strane, više temperature dovode do bržeg geliranja, pa se doza modificiranog koagulanta može shodno tome smanjiti.
5. Potrebno je dovoljno vremena za geliranje i preporučljivo je ostaviti gel da stoji neometano kako bi se osigurala temeljna gelacija.
6. Kada je temperatura niska, puferske otopine za odvajanje gela i koncentrovanog gela mogu kristalizirati zbog prisustva SDS otopine. Mogu se zagrijati na 37 stepeni, a zatim koristiti nakon topljenja.
7. Ako postoji potreba za super brzim reagensima za pripremu gela visoke rezolucije, možete kupiti ostale proizvode naše kompanije: Super Fast Colorful Gel Preparation Kit reagens serije (G2041/G2042/G2043/G2044/G2045,G2060/G2061/ G2062/G2063/G2064), i Serija kompleta reagensa za pripremu super brzih šarenih gela visoke rezolucije (G2066/G2067/G2068, G2071/G2072/G2073), koja može zadovoljiti različite eksperimentalne potrebe.
1. Nosite laboratorijski mantil i jednokratne rukavice tokom rada.
Samo za istraživačku upotrebu!
Popularni tagovi: sds-page brzi akrilamid kit, Kina sds-stranica brzi akrilamid kit proizvođači, dobavljači, tvornica
