B ćelije sisara su primarno klasifikovane u progenitorne B ćelije, pre-B ćelije, nezrele B ćelije, folikularne B ćelije, B ćelije marginalne zone, B ćelije pamćenja, plazma ćelije i druge tipove.
1. Progenitor B ćelije
Progenitor B ćelije su ćelije preci sa ograničenim kapacitetom samoobnavljanja, podeljene na rane pro-B ćelije i kasne pro-B ćelije. Tokom ranog stadijuma pro-B ćelija dolazi do preuređivanja teškog lanca DJ-a, dok tokom kasne pro-B ćelijske faze dolazi do preuređivanja teškog lanca VDJ. Ove ćelije također eksprimiraju markere specifične za B-lozu, kao što su Thy-1+, Tdt+, B200+ i mb-1+ molekuli.
2. Pre-B ćelije
Stadij pre-B ćelija počinje ekspresijom pre-B ćelijskog receptora (pre-BCR), koji se sastoji od μ lanca i surogatnih lakih lanaca (uključujući VpreB i λ5 proteine homologne V i C regionima lakog lanca). Pre-BCR signalizacija pokreće klonsku ekspanziju B ćelija i inhibira dalje preuređenje teškog lanca VDJ, osiguravajući isključenje alela. TdT i CD10 su korisni markeri za razlikovanje pre-B ćelija od drugih razvojnih faza B ćelija. Ova faza takođe izražava antigene diferencijacije kao što su MHC II, CD19, CD20 i CD24. Pre-B stanicama nedostaje reakcija na antigene i ne pokazuju imunološke funkcije.
3. Nezrele B ćelije
Nakon razvoja u koštanoj srži, pre-B ćelije sazrijevaju u nezrele B ćelije, koje na svojoj površini izražavaju samo potpuni membranski vezan IgM (mIgM). Ako se ovaj mIgM veže za samo-antigene u koštanoj srži, to dovodi do apoptoze ćelije, što rezultira brisanjem klona. Neke nezrele B ćelije koje prepoznaju samo-antigene mogu promijeniti specifičnost svog BCR-a kroz uređivanje receptora. Nezrele B ćelije počinju da gube ekspresiju Tdt i CD10, ali mogu da eksprimiraju CD22, CD21 i FcR. U međuvremenu, nivoi ekspresije CD19, CD20 i MHC II molekula se povećavaju.
4. Folikularne (FO) B ćelije
Folikularne B ćelije su glavna podskupina B ćelija kod miševa i ljudi. Mala podskupina T2 prelaznih B ćelija sazrijeva u folikularne B ćelije u koštanoj srži, ali većina nezrelih B ćelija migrira u slezenu, gdje sazrijeva u folikularne B ćelije ili B ćelije marginalne zone. Većina mišjih i ljudskih folikularnih B ćelija izražava visoke nivoe IgD i CD23/FcεRⅡ, zajedno sa niskim nivoom IgM. Pored toga, ove ćelije eksprimiraju CD22/Siglec-2, a kod miševa niske nivoe CD1d. U poređenju sa B ćelijama marginalne zone kod miševa i ljudi, folikularne B ćelije imaju niže nivoe CD21. Nakon aktivacije, folikularne B stanice se periferno diferenciraju u kratkovječne plazma stanice ili ulaze u reakcije zametnog centra zavisne od T stanica.
5. Marginalna zona (MZ) B ćelija
Kod miševa, B stanice marginalne zone nalaze se u bijeloj pulpi slezene između marginalnog sinusa i crvene pulpe, omogućavajući im da brzo reagiraju na patogene koji se prenose krvlju dok sudjeluju u imunološkim odgovorima neovisnim o T stanicama i T stanicama. T2 prelazne B ćelije migriraju u slezenu i sazrevaju ili u B ćelije marginalne zone ili u folikularne B ćelije. B ćelije marginalne zone čoveka su cirkulišuće ćelije koje se nalaze ne samo u slezeni već i na mnogim drugim lokacijama. Za razliku od folikularnih B ćelija, ćelije B marginalne zone izražavaju visoke nivoe IgM i niske nivoe IgD i CD23/FcεRⅡ. Pored toga, i mišje i ljudske B ćelije marginalne zone izražavaju visoke nivoe CD1 (CD1d kod miševa, CD1c kod ljudi) i CD21.
6. Memorijske B ćelije
Aktivirane naivne B ćelije se diferenciraju u memorijske B ćelije u zametnim centrima, koje se mogu brzo diferencirati u plazma ćelije nakon ponovnog izlaganja antigenu.
B ćelije memorije ljudi i miša su heterogene populacije. Kod miševa, CD19, CD80, CD73 i PD-L2/CD273 se obično koriste za identifikaciju memorijskih B ćelija. Kod ljudi, memorijske B ćelije se obično identifikuju ekspresijom CD27, zajedno sa niskim nivoom CD23/FcεRⅡ i odsustvom markera plazma ćelija Syndecan-1/CD138. DEP-1/CD148 se također često koristi za identifikaciju B ćelija ljudske memorije, kao i visoki nivoi B7-1/CD80, B7-2/CD86 i CD95.
7. Plazma ćelije
Plazma ćelije su terminalno diferencirane ćelije koje luče antitela, neophodne za trenutne i dugotrajne odgovore antitela nakon izlaganja antigenu. To su velike, neproliferativne ćelije sa minimalnom površinskom ekspresijom imunoglobulina. Plazma ćelije luče velike količine antitijela i smatraju se zrelijima od njihovih prekursora stanica, plazma blasta. Kratkovječne plazma stanice obično se pojavljuju u crvenoj pulpi slezene odmah nakon infekcije, dok se dugovječne plazma stanice pojavljuju sedmicama nakon izlaganja antigenu, često se nalaze u specijalizovanim nišama u koštanoj srži.
Mišje i ljudske plazma ćelije se obično identificiraju kao CD19-Syndecan-1/CD138+ ćelije. Ljudske plazma ćelije takođe eksprimiraju visoke nivoe CD38, dok mišje plazma ćelije eksprimiraju Ly6k, Sca-1/Ly6 i CD98, ali ne i B220/CD45R. Pored toga, i mišje i ljudske plazma ćelije ne eksprimiraju IgD, pokazuju niske nivoe molekula MHC klase II i visoke nivoe CD27, CXCR4, BCMA i transkripcionih faktora XBP1, IRF4 i BLIMP1.
▇ B ćelijski marker
CD19:GB{0}}, GB12061, GB15006, GB15061
CD20:GB11540
CD22:GB115558
CD27:GB11583
CD30:GB111140
CD38:GB114831, GB114832
CD40:GB115671
CD45:GB113885, GB113886
CD74:GB115427, GB115175
CD138:GB115052
VPREB1 / CD179A:GB114476
IgM:GB112040
Napomena:Servicebio antitela se mogu koristiti samo u naučnim istraživanjima.
1. CD19
Cat. br.: GB11061-1, GB12061, GB15006, GB15061
CD19 služi kao biomarker za B ćelije, regulišući njihov razvoj, proliferaciju i diferencijaciju preko receptora B ćelija (BCR) i posreduje u citotoksičnosti T ćelija protiv ciljnih ćelija. Postoje razlike u imunofenotipovima normalnih i malignih plazma ćelija. Protočna citometrija obično pokazuje da normalne plazma ćelije eksprimiraju CD19, dok maligne plazma ćelije, koje su pretežno CD19-negativne, pokazuju negativan obrazac bojenja.
2. CD20
Cat. br.: GB11540
CD20 je površinski molekul limfocita, klasični marker B-ćelija, eksprimiran od pre-B ćelija do zrelih B ćelija, i izgubljen u plazma blastima i plazma ćelijama. Ima molekularnu težinu od 33 do 37 kDa i kodiran je genom MS4A1 koji se nalazi na hromozomu 11. Funkcionalno se vjeruje da je kalcijumski kanal i reguliše funkciju B-ćelija vezivanjem za B-ćelijski receptor.
3. CD22
Cat. broj: GB115558
CD22 se primarno eksprimira intracelularno u ranom razvoju B-ćelija, uključujući pro-B i pre-B ćelije, a kako B ćelije sazrevaju, ova ekspresija se pomera na membranu. Najveća je ekspresija u zrelim B ćelijama i izražena je u većini malignih bolesti B-ćelija, uključujući akutnu limfoblastnu leukemiju (B-ALL), ne-Hodgkin limfom (NHL) i leukemiju dlakavih ćelija (HCL). Konkretno, CD22 se eksprimira na ćelijama leukemije kod preko 90% ALL pacijenata.
4. CD27
Cat. br.: GB11583
Kod ljudi, memorijske B ćelije se obično identifikuju po njihovoj ekspresiji CD27.
5. CD30
Cat. br.: GB111140
CD30 je član superfamilije receptora faktora tumorske nekroze, primarno eksprimiran na površini aktiviranih T ćelija, B ćelija i NK ćelija, sa niskim nivoom ekspresije u normalnim fiziološkim uslovima.
6. CD38
Cat. br.: GB114831, GB114832
CD38 je prognostički faktor za hroničnu B-ćelijsku limfocitnu leukemiju (B-CLL). Bolest sa najvećim fokusom na CD38 je multipli mijelom (MM).
7. CD40
Cat. broj: GB115671
CD40 je član superfamilije receptora faktora tumorske nekroze, široko izražen na imunim ćelijama, posebno na B ćelijama, dendritskim ćelijama (DC) i monocitima. Igra ključnu ulogu u premošćivanju urođenog i adaptivnog imuniteta.
8. CD45
Cat. Broj: GB113885,GB113886
CD45 je tip I transmembranska protein tirozin fosfataza (PTPaza) izražena u svim hematopoetskim matičnim ćelijama (HSC) osim u crvenim krvnim zrncima i trombocitima.
9. CD74
Cat. br.: GB115427,GB115175
CD74 je eksprimiran u svim B ćelijama i određenim podskupovima T ćelija (MHC II pozitivni), prvenstveno u limfocitima zametnog centra. Uglavnom se koristi kao marker za B ćelije i njihove tumore. Istraživanja sugeriraju da je CD74 povezan s različitim ljudskim bolestima, uključujući autoimune bolesti (kao što je sistemski eritematozni lupus), kao i aterosklerozu, Alchajmerovu bolest i rak. Dodatno, CD74 je prekomjerno eksprimiran u više tumora i povezan je s invazijom na karcinom renalnih stanica bistrih stanica, rak želuca i rak gušterače.
10. CD138
Cat. br.: GB115052
CD138 je specifičan marker za plazma ćelije, takođe poznate kao efektorske B ćelije. Oni prvenstveno nastaju iz naivnih B ćelija aktiviranih antigenom ili memorijskih B ćelija i odgovorne su za sintezu i skladištenje antitijela.
11. VPREB1 / CD179A
Cat. br.: GB114476
Surogat laki lanac sastavljen od VPREB1 (CD179A) i lLAMBDA5 (CD179B) eksprimiran je u pre-B ćelijama u nekompletnom obliku imunoglobulina. Nakon diferencijacije u nezrele i zrele B ćelije, CD179A/B se gube i zamjenjuju konvencionalnim lakim lancima. Stoga, CD179A/B može poslužiti kao marker za pre-B ćelije.
12. IgM
Cat. Broj: GB112040
B ćelije marginalne zone kod miševa nalaze se u bijeloj pulpi slezene između marginalnog sinusa i crvene pulpe, dok su kod ljudi ćelije marginalne zone koje slobodno recirkuliraju ćelije koje se nalaze ne samo u slezeni već i na mnogim drugim lokacijama. Za razliku od folikularnih B ćelija, ćelije B marginalne zone izražavaju visoke nivoe IgM.
