Komplet za ispitivanje vitalnosti ATP luminiscencije ćelija

 

Naziv proizvoda	Cat. br.	Spec.
Komplet za ispitivanje vitalnosti ATP luminiscencije ćelija	G1612-100T	10 mL
	G1612-1000T	100 mL

 

 

ATP je važan energetski molekul u ćeliji koji igra važnu ulogu u različitim fiziološkim i biohemijskim aktivnostima ćelije, a poznat je i kao energetska valuta u organizmu. Stanje ćelije i brojevi ćelija pokazuju korelaciju sa ATP-om. Stoga se broj ćelija ili vitalnost može procijeniti relativnim nivoom ATP-a.

Ovaj komplet se zasniva na principu luciferaze zavisne od ATP koja katalizuje luciferin za proizvodnju fluorescencije, koja može efikasno detektovati i proceniti intracelularni nivo ATP-a. U poređenju sa tradicionalnim metodama kao što su CCK-8 i MTT, fluorescentna metoda ima prednosti visoke osjetljivosti i širokog raspona.

 

 

Brod sa suhim ledom; Čuvajte na -80 stepen daleko od svjetlosti 12 mjeseci; Čuvajte na -20 stepenu dalje od svjetlosti, preporučuje se upotreba u roku od 6 mjeseci.

 

 

Komponenta	G1612-100T	G1612-1000T
Komplet za ispitivanje vitalnosti ATP luminiscencije ćelija	10 mL	100 mL
Manual	1 kom

 

 

1. Radovi na prethodnoj obradi ćelije:Inokulirajte ćelije određene gustine u pločicu sa 96-jažicom (molimo odaberite bijelu neprozirnu ploču za jažice prikladnu za ćelijsku kulturu ili koristite običnu ploču za ćelijsku kulturu. Prilikom obavljanja detekcije, prenesite otopinu u bijele jažice za detekciju na minimizirati smetnje između susjednih bunara.) i prethodno tretirati ćelije u skladu sa svrhom eksperimenta;

2. Priprema uzorka za ATP standarde (opciono):ATP standard (samostalni) se postepeno razrjeđuje puferom kao što je PBS ili bazalni medij i dodaje se na ploču s jažicom u količini od 100 μL/jamici;

3. Ispitivanje vitalnosti ćelija:

3.1. Unaprijed izvadite reagens ATP Luminescence Cell Viability Assay, odmrznite ga i vratite na sobnu temperaturu;

3.2. Uklonite ploču sa ćelijskom kulturom i ekvilibrirajte na sobnoj temperaturi 5-10 min;

3.3. Reagens ATP Luminescence Cell Viability Assay Reagens se dodaje direktno na ploču sa jažicom u količini od 100 μL/jamici;

3.4. Protresite horizontalno 1-2 min ili dodirnite za miješanje;

3.5. Nakon stajanja od 3 minute, hemiluminiscencijski test se može izvesti pomoću luminometra, multifunkcionalnog markera enzima s modulom za detekciju kemiluminiscencije ili drugih instrumenata koji mogu detektirati bioluminiscenciju (napomena: sam uzorak ne emituje svjetlost fluorescentnom metodom, ali treba da bude pobuđen određenom talasnom dužinom ekscitacione svetlosti i zatim primljen kroz poseban kanal.In hemiluminiscencija, sam uzorak emituje svjetlost i ne mora biti pobuđen određenom talasnom dužinom ekscitacionog svjetla da bi ga detektovala odgovarajuća oprema);

4. Analiza podataka:Sljedeća analiza podataka zasniva se na oduzimanju praznine u pozadini

4.1. Analiza relativnog broja ćelija (proliferacije): Prema vrednosti intenziteta fluorescencije odredite broj ćelija.

4.2. Proračun vitalnosti ćelije (vijabilnost proliferacije ćelije ili održivost citotoksičnosti):

Napomena:

A (skupina za doziranje): tretirane ćelije + reagens za ispitivanje vitalnosti ćelija ATP luminiscencije

A1 (bez grupe za doziranje): normalne netretirane ćelije + reagens za ispitivanje vitalnosti ćelija ATP luminiscencije

A0 (prazna kontrolna grupa): medij za ćelijsku kulturu (bez ćelija) + reagens za ispitivanje vitalnosti ćelija ATP luminiscencije

4.3. Kvantitativna analiza sadržaja ATP-a (opciono):

4.3.1. Vrijednost intenziteta fluorescencije detektovane ATP standardne krive oduzima se od podataka o vrijednosti intenziteta fluorescencije prazne kontrolne grupe, a standardna kriva se iscrtava pomoću softvera kao što je Excel i dobije se formula:

gdje a predstavlja nagib, a b predstavlja presek.

4.3.2. X-vrijednost (sadržaj ATP) u sistemu analize izračunava se prema formuli:

Izračunajte vrijednost Y zamjenom nagiba a i presjeka b iz 4.3.1 u gornju jednačinu.

4.3.3. Proračun sadržaja ATP-a u uzorcima:

 

1. Kako bi se osiguralo da se test reagens efikasno koristi, preporučuje se skladištenje u malim porcijama i izbjegavanje ponovnog zamrzavanja i odmrzavanja.

2. Iskrivljavanje vremena testiranja se kontrolira unutar 5-30 min kako bi se osigurala tačnost podataka testiranja.

3. Dio taloženja reagensa nakon odmrzavanja je normalna pojava, prije upotrebe se potpuno protrese kako bi se osiguralo njegovo potpuno otapanje.

4. Pokušajte izbjeći svjetlost i dodajte test reagense u kratkom vremenskom periodu. Preporučuje se upotreba pipete sa više jažica za dodavanje uzoraka i pazite na konzistenciju zapremine pipete u svakoj jažici pipete.

5. Radi vašeg zdravlja i sigurnosti, tokom rada nosite laboratorijski mantil i rukavice.

 

Samo za istraživačku upotrebu!

 

 

Popularni tagovi: atp komplet za ispitivanje vitalnosti luminescentnih ćelija, Kina proizvođači, dobavljači, tvornica kompleta za ispitivanje vitalnosti luminescentnih ćelija atp